میزان زنده مانی و تغییرات فراساختاری سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند نژاد قزل پس از انجماد در محیط انجمادی حاوی غلظت های مختلف fbs

thesis
abstract

در مطالعه حاضر، سلول های بیضه با استفاده از دو مرحله هضم آنزیمی از بیضه 4 راس بره حدود 2 ماهه نژاد قزل استخراج شد. نمونه گیری از بیضه به روش tese صورت گرفت. پس از تائید شدن ماهیت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی و سلول های سرتولی موجود در سوسپانسیون سلولی حاصل با انجام آزمایش ایمونوسیتوشیمی گیرنده های oct-4 و plzf و ویمنتین، این سلول ها به مدت 12 روز در شرایط آزمایشگاه کشت داده شده و در قالب سه گروه انجمادی برای مدت 1 ماه در محیط انجمادی حاوی ماده محافظ کننده در برابر سرمای dmso و fbs به روش انجماد آهسته در دمای -۱۹۶ درجه سانتی گراد و در نیتروژن مایع منجمد گردید. گروه های انجمادی 1 و 2 و 3 به ترتیب دارای ۵۰، 70 و 90 درصد fbs بودند. میزان dmso موجود در تمامی گروه ها 10 درصد در نظر گرفته شده بود. سلول ها پس از گذشت 1 ماه با روش ذوب سریع و در حمام آب حدود 37 درجه سانتی گراد از انجماد خارج شد. پس از ذوب سلول ها درصد زنده مانی سلول ها به وسیله رنگ آمیزی تریبان بلو مورد ارزیابی قرار گرفته و سپس سلول ها تثبیت شده و از نظر میزان آسیب وارده بر سلول ها در اثر انجماد، توسط میکروسکوپ الکترونی انتقالی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج حاصله نشان دهنده کاهش میزان زنده مانی سلول ها پس از انجماد بود. همچنین در این مطالعه مشاهده شد که افزایش میزان زنده مانی سلول ها پس از انجماد دارای ارتباط مستقیمی با افزایش میزان fbs موجود در محیط انجمادی می باشد (به ترتیب 12/64 %، 03/67 % و 41/72 % برای قبل از انجماد وگروه های 1، 2 و 3). این در حالی است که در مطالعه مقاطع نیمه نازک رنگ آمیزی شده با تولوئیدن بلو و گرید های الکترونی تهیه شده با افزودن fbs به میزان ۷۰٪ در محیط انجمادی٬ کاهش قابل ملاحظه ای از تغییرات آسیب شناختی مشاهده گردید. لازم به یادآوری است که با افزودن fbs به میزان ۹۰٪ تغییرات آسیب شناختی شدیدتر از گروه دوم(۷۰٪ fbs) ولی کمتر از گروه اول (۵۰٪ fbs) قابل مشاهده بود.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده مانی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد

سابقه و هدف: سلول­ های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیست­فناوری دارند. جهت نگهداری طولانی­مدت این سلول­ ها از تکنیک انجماد استفاده می­ شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت­ های مختلف fbs و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود. مواد و روش ­ها: سلول­ های بیضه­ بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله­ ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالص­سازی گردید. سپس، سلو...

full text

اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده‌ مانی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد

سابقه و هدف: سلول­ های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیست­فناوری دارند. جهت نگهداری طولانی­مدت این سلول­ ها از تکنیک انجماد استفاده می­ شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت­ های مختلف FBS و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود. مواد و روش ­ها: سلول­ های بیضه­ بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله­ ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالص­سازی گردید. سپس، سلو...

full text

تأثیر فرآیندهای انجماد و خشک کردن انجمادی بر نرخ زنده مانی باکتری¬های اسید لاکتیک خمیرترش

full text

اثرات غلظت های مختلف ساکارز و سرم جنین گوساله بر زنده مانی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد

سلول های بنیادی اسپرماتوگونی دارای قدرت خودنوزایی و انتقال ژن به نسل بعدی هستند. جهت نگهداری و ذخیره سازی طولانی مدت این سلول ها از تکنیک انجماد استفاده می شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت های مختلف fbs (10 و 20 درصد) و سطوح مختلف سوکروز (07/0، 14/0 و 21/0 مول) روی درصد حیات sscs بره قبل از انجماد و متعاقب یخ گشایی بود. بیضه ی بره های با سنین کمتر از 3 ماه از کشتارگاه تهیه و متعاقب جدا...

مطالعه تغییرات فراساختاری سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفندان قزل در حضور غلظت های مختلف فاکتور رشد شبه انسولینی-1 (igf-i)

سلول های بنیادی اسپرماتوگونی تنها سلول های بنیادی بدن هستند که دارای قدرت خودنوسازی و همچنین توانایی انتقال ژن به نسل های بعدی می باشند. امروزه جداسازی، کِشت و پیوند این سلول ها در دامپزشکی به منظور تولید حیوانات ترانس ژنیک، اصلاح نژاد دام و درمان ناباروری در حیوانات با ارزش مورد توجه قرار گرفته است اما همواره به دلیل ناکافی بودن تعداد و میزان پایین زنده مانی این سلول ها در محیط کشت، محدودیت های...

15 صفحه اول

اثرسلنیوم بر میزان حرکت، مورفولوژی و زنده مانی اسپرم پس ازپدیده انجماد و ذوب

  زمینه: وجود سلنیوم برای عملکرد طبیعی و انجام فرایند اسپرماتوژنز ضروری است . این ماده به عنوان عامل کمک­کننده آنتی اکسیدانی به کاهش رادیکال­های آزاد اکسیژن منجر می­شود و انتظار می­رود در افزایش باروری مؤثر باشد .   هدف : مطالعه به منظور تعیین اثر سلنیوم بر حرکت، مورفولوژی و زنده­مانی اسپرم بعد از فرایند انجماد و ذوب انجام شد.   مواد و روش­ها: این مطالعه تجربی بر 42 نمونه مایع سمن با شاخص­های ط...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده دامپزشکی

Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023